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GB 5413.11-2010 婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定 标准内容
日期:2022-12-21 14:34:00作者:百检网 人气:0

GB5413.11-2010婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定内容是什么?百检网检测范围广泛,可根据客户需求选择合适的检测标准及项目安排检测,全国近千家合作实验室,CMA/CNAS资质齐全,可就近安排寄样检测。今天百检网就给大家简单介绍一下GB5413.11-2010婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定标准内容。

1.范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定方法。

本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定。

2.规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

3.原理

样品在稀盐酸环境中恒温水解,酶解,样液用碱性铁氰化钾衍生,正丁醇(或异丁醇)萃取后,经C18反相色谱柱分离,用荧光检测器(Ex:375mm,Em:435nm)检测,外标法定量。

4.试剂和材料

除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1 正丁醇或异丁醇。

4.2 铁氰化钾。

4.3 氢氧化钠。

4.4 浓盐酸。

4.5 三水乙酸钠。

4.6 冰乙酸。

4.7 甲醇:色谱纯。

4.8 维生素B1标准品:硫胺素盐酸盐或硫胺素硝酸盐,纯度≥99%。

4.9 铁氰化钾溶液(20g/L):称取2g铁氰化钾(4.2),用水溶解并定容至100mL。临用前配制。

4.10 氢氧化钠溶液(100g/L):称取25g氢氧化钠(4.3),用水溶解并定容至250mL。

4.11 碱性铁氰化钾溶液:将5mL铁氰化钾溶液(4.9)与200mL氢氧化钠溶液(4.10)混合。临用前配制。

4.12 盐酸(0.1mol/L):吸取9mL浓盐酸(4.4),溶于1000mL水中。

4.13 盐酸(0.01mol/L):吸取0.1mol/L盐酸(4.12)50mL,用水稀释并定容至500mL。

4.14 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取6.80g三水乙酸钠(4.5),加900mL水溶解,用冰乙酸(4.6)调pH值至4.0~5.0,定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤。

4.15 乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.22g三水乙酸钠(4.5),用水溶解并定容至100mL。

4.16 混合酶溶液,称取2.345g木瓜蛋白酶(活力单位≥600U/g)、1.175g淀粉酶(活力单位≥4000U/g),用水溶解并定容至50mL。临用前配制。

4.17 标准溶液

4.17.1 维生素B1标准储备液(500μg/mL):称取相当于硫胺素50mg(*至0.1mg)的维生素B1标准品(4.8),用0.01mol/L盐酸(4.13)溶解并定容于100mL。置于0℃~4℃冰箱中,保存期为3个月。

4.17.2 维生素B1标准中间液:准确吸取200mL标准储备液(4.17.1),用水稀释并定容至100mL,此溶液中维生素B1浓度为10μg/mL。临用前配制。

4.17.3 维生素B1标准工作液:分别吸取维生素B1标准中间液(4.17.2)0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL,用水溶解并定容至100mL。该标准系列浓度分别为0μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.5μg/mL、1.00μg/mL。临用前配制。

5.仪器和设备

5.1 高效液相色谱仪,带有荧光检测器。

5.2 高压灭菌锅。

5.3 离心机:转速≥4000转/分钟。

5.4 pH计:精度0.01。

5.5 组织捣碎机(转速在0转/分钟~12000转/分钟可调)。

5.6 0.45μm微孔有机滤膜。

5.7 天平:感量为0.001g和0.0001g。

6.分析步骤

6.1 试样的处理

6.1.1 试液提取

称取5g~10g(*至0.01g)试样(如有必要,将试样放入捣碎机中捣碎;试样中含维生素B15μg以上)于100mL三角瓶中,加60mL0.1mol/L盐酸(4.12),充分摇匀,用棉花塞和牛皮纸封口,放入高压灭菌锅内,在121℃下保持30min,待冷却至40℃以下后取出,轻摇数次;用2.0mol/L乙酸钠溶液(4.15)调pH值至4.0左右,加入2.0mL(可根据酶活力不同适当调整用量)混合酶液(4.16),摇匀后,置于37℃的培养箱中过夜;将酶解液转移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,滤纸过滤,取滤液备用。

6.1.2 试液衍生化

取上述滤液1000mL于25mL具塞比色管中,加入5mL碱性铁氰化钾(4.1),充分混匀后,加10.00mL正丁醇(或异丁醇)(4.1),强烈振荡后静置约10min,充分分层,吸取正丁醇(或异丁醇)相(上层)于4000转/分钟~6000转/分钟离心5min,取上清液经有机微孔滤膜过滤(5.6),供进样用。

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