DB13/T1106-2009液体乳中青霉噻唑酸钾的测定高效液相色谱法内容是什么?百检网检测范围广泛，可根据客户需求选择合适的检测标准及项目安排检测，全国近千家合作实验室，CMA/CNAS资质齐全，可就近安排寄样检测。今天百检网就给大家简单介绍一下DB13/T1106-2009液体乳中青霉噻唑酸钾的测定高效液相色谱法标准内容。

1 范围

本标准规定了液体乳中青霉噻唑酸钾的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于液体乳中青霉噻唑酸钾的测定。

本标准的方法检出限：10.0μg/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件，其*新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

试样中的青霉噻唑酸钾在去除蛋白、脂肪处理后，经高效液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定性定量。

4 试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。

4.1 甲醇：色谱纯

4.2 磷酸二氢钠。

4.3 磷酸二氢钠溶液(pH=4.5)：

4.4 无水乙醇。

4.5 青霉素V钾标准品：纯度≥99‰。

4.6 青霉噻唑酸钾标准储备液(1mg加L)：准确称取0.1000g青霉素Ⅴ钾置于100mL容量瓶中，加入1mL青霉素酶，室温放置2h后用水定容，摇匀备用。

4.7 青霉素噻唑酸钾标准冮工作溶液：根据需要吸取适量青霉噻唑酸钾标准储备液，用空白样品稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。

5 仪器

5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器(UV)。

5.2 分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。

5.3 低温高速离心机。

5.4 水相微孔滤膜：0.45μm。

6 测定步骤

6.1 试样溶液的制备

准确称取25g(*到0.01g)牛乳于50mL离心管中，4000r/min低温(4℃)离心10min；去除上层脂肪层；再加入25mL无水乙醇，20000rmin低温(4℃)离心10min，取上清液定容至50mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，待高效液相色谱分析。

6.2 液相色谱条件

检测波长：230nm。

色谱柱：ODS C 18 5μm，250mm×2.1mm或相当者。

流动相：磷酸二氢钠溶液：甲醇=50：50。

流速：1mL/min。

柱温：30℃。

进样量：20μL。

6.3 测定

用青霉噻唑酸钾标准储备溶液配成的基质标准溶液分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中青霉噻唑酸钾的响应值均应在仪器测定的线性范围内。

7 结果计算

从标准工作曲线上得到试样中相应的青霉噻唑酸钾浓度后，结果按公式(1)计算：

式中：

X——试样中被测组分残留量，单位为微克每千克(μg/kg)。

C——从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL)。

V——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)。

m——试样质量，单位为克(g)。

F——稀释倍数。

8 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的*差值不得超过算术平均值的10%。

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